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猴白介素4(IL-4)Elisa試劑盒操作步驟及注意事項

發布時間:2023-06-28瀏覽次數:852返回列表

  猴白介素4(IL-4)操作步驟:

  1.加入50ul標準品(Standards)、血清標本于相應反應板孔中。

  2.每孔加入100ul酶聯物(Conjugate),輕輕混勻30秒(重要),室溫60分鐘。

  3.洗板:甩盡板內液體,用蒸餾水或者洗滌液(普通洗滌液,自配)洗滌反應板,并去除 水滴(在厚疊吸水紙上拍干);這樣反復洗滌5次。

  4.每孔加入100ul顯色液,輕輕混勻10秒,室溫20分鐘。

  5.每孔加入50ul終止液(StopSolution)。輕輕混勻30秒;30分鐘內在450nm處讀OD值。elisa試劑盒

  樣本處理及要求:

  1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。

  2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

  3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

  4.,細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右 (2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

  5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

  6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

  7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

  猴白介素4(IL-4)ELISA試劑盒注意事項:

  1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

  2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

  3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

  4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物請避光保存。

  7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

  8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

  9.本試劑不同批號組分不得混用。

  10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

  白介素12(IL-12)ELISA檢測試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品,勵志研發和銷售的綜合性生物公司,產品遠銷多個國家和地區,我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發高質量的新產品,提供客戶滿意的綜合服務質量”的方針。

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