古朵技術(shù)分享—蛋白純化實驗中生物緩沖液的選擇

  蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能需要在合適的pH值環(huán)境中才能維持，因此在蛋白的制備及純化過程中，生物緩沖液的選擇非常重要，只有合適的緩沖液才能保證蛋白的活性和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。

  蛋白純化過程緩沖液作用

  用于蛋白純化的緩沖劑有很多種，在維持體系的pH同時，要保證蛋白在純化過程中不能失活，或者是盡量減少蛋白失活的量，在蛋白純化的每一個步驟中都要保持蛋白的可溶性和活性。

  蛋白純化緩沖液要求

  蛋白純化過程中的緩沖液既要防止蛋白降解，也要防止蛋白聚合，其對實驗結(jié)果影響顯著。在選擇和試劑緩沖液時應(yīng)考慮以下幾個因素：pH值、緩沖體系、鹽離子、還原劑和穩(wěn)定劑。其中每一個因素都要根據(jù)所純化的目標(biāo)蛋白進行優(yōu)化，并以目標(biāo)蛋白的活性作為優(yōu)化的評估標(biāo)準(zhǔn)。

  了解蛋白穩(wěn)定性條件

  蛋白的種類很多，不同的蛋白適應(yīng)的pH值有差異，需根據(jù)其適pH值來選擇緩沖液。很多時候采用的是pH是7.4，這是模仿的生物條件，大多數(shù)蛋白在這個pH值下是穩(wěn)定的。不過也有一些是例外的，這就需要調(diào)整pH值，以保持蛋白是可溶的且不會降解。

  蛋白純化常用的緩沖劑

  蛋白純化過程中常用的緩沖液有Tris、Tricine、Bis-Tris、MOPS等，其中普遍的是用Tris，它的緩沖范圍接近生理pH值，且有著較低的離子強度，是蛋白質(zhì)的良好溶劑，能保證蛋白的穩(wěn)定性。需注意的是配制緩沖液時，盡量避開目標(biāo)蛋白的等電點pl。因為蛋白在其等電點的pH溶液中表面沒有靜電荷，帶百分子間排斥力減小，容易聚集，溶解度降低。

  現(xiàn)在需純化的蛋白的適應(yīng)pH值、等電點、以及緩沖液的緩沖范圍都是可以查到的，直接按對應(yīng)要求匹配即可

  生物緩沖液 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量”的方針。