古朵課堂：培育基怎么消除組織培育的污染?

  當(dāng)重要的培育污染時(shí)，研究者或許企圖消除或控制污染。首要，確認(rèn)污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母，把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開(kāi)，用試驗(yàn)室消du劑消du培育器皿和超凈臺(tái)，檢查HEPA過(guò)濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素或許對(duì)一些細(xì)胞系有du性，因而，做劑量反響試驗(yàn)確認(rèn)抗生素和抗霉菌素發(fā)生du性的劑量水平。下面是推薦的確認(rèn)du性水平緩消除培育污染的試驗(yàn)過(guò)程。

  ① 在無(wú)抗生素的培育基中消化、計(jì)數(shù)和稀釋細(xì)胞，稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度。

  ② 分散細(xì)胞懸液到多孔培育板中，或幾個(gè)小培育瓶中。在一個(gè)濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生素加入到每一個(gè)孔中。

  ③ 每天觀測(cè)細(xì)胞du性目標(biāo)，如脫落，呈現(xiàn)空泡，匯合度下降和變圓。

  ④ 確認(rèn)抗生素du性水平后，運(yùn)用低于du性濃度2-3倍濃度的抗生素的培育液培育細(xì)胞2-3代。

  ⑤ 在無(wú)抗生素的培育基中培育細(xì)胞一代。

  ⑥ 重復(fù)過(guò)程4。

  ⑦ 在無(wú)抗生素的培育基中培育4-6代，確認(rèn)污染是否以已被消除。

  培育基操作建議：

  1、商品化的應(yīng)根據(jù)運(yùn)用說(shuō)明書(shū)上的要求進(jìn)行貯存。標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)有批號(hào)，生產(chǎn)日期、有效期及有關(guān)特性。所選用的保藏和運(yùn)送條件應(yīng)使限度失掉水分并提供機(jī)械維護(hù)。

  2、配制好之后應(yīng)保存在2～25℃避光的環(huán)境。若保存于非密閉容器中，一般在三周內(nèi)運(yùn)用;若保存于密閉容器中，一般在一年內(nèi)運(yùn)用，瓊脂培育基不得在0℃或0℃以下存放，防止冷凍破壞凝膠特性。若要長(zhǎng)期保存，瓊脂平板應(yīng)密閉包裝或置于密閉容器中以防止水分丟失。

  3、保存于密閉容器中，可防止水分丟失以延長(zhǎng)保存時(shí)刻。

  4、滅菌后應(yīng)立即取出，不得儲(chǔ)藏在高壓菌器中，避免影響質(zhì)量。制備好之后應(yīng)保存在2～25℃、避光的環(huán)境。

  5、固體培育基滅菌后的再融化應(yīng)在加熱的水浴中或選用流通蒸汽進(jìn)行，只允許一次，融化后應(yīng)放在45～50℃的水浴中，不得超越8小時(shí)。

  培育基上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門(mén)從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷(xiāo)售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷(xiāo)多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。