目的要求：

1．掌握甾體皂苷元（親脂性和中性成分）的提取方法。

2．熟悉薯蕷皂苷元的性質(zhì)及鑒定法。

簡(jiǎn)介：

薯蕷皂苷元（Diosgenin）是一種甾體皂苷元，分子式（C27H42O31）,分子量414.61，為白色結(jié)晶，mp204～207℃，[ ]25D-129.3（CHCl3），溶于一般有機(jī)溶劑和醋酸，不溶于水。目前，是制造多種甾體藥物如口服避-孕藥（I號(hào)，II號(hào)避-孕藥片）和甾體激素（如可的松）等的重要原料。

在植物界主要分布在薯蕷科薯蕷屬（Dioscorea）植物中，我國(guó)的薯蕷屬植物有80余種，其中只有薯蕷根莖組（Stenophora）的17種、I亞種及一變種才含有甾體皂苷元，其它則含有多量淀粉，無(wú)皂苷元。已用于生產(chǎn)的主要有盾葉薯蕷（D.Zingiberensis C. H. Wright），穿龍薯蕷（D.nipponica Makino），黃山藥（D.panthaica prain et Burkil）,紫黃姜(D.nipponica Makinovar rosthani prain et Burk)等。

在植物體內(nèi)薯蕷皂苷元是與葡萄糖、鼠李糖結(jié)合成薯蕷皂苷（Dioscin）而存在。提取分離時(shí)，一般是先用稀酸將薯蕷皂苷水解成薯蕷皂苷元與單糖（葡萄糖、鼠李糖）。因薯蕷皂苷元不溶于水，混存于植物殘?jiān)?，故可用有機(jī)溶劑（如石油醚）直接從植物殘?jiān)刑崛〕鍪硎氃碥赵?

提取方法：

1．皂苷預(yù)試：

2．薯蕷皂苷元的提?。?

注一：檢查薯蕷皂苷元是否提盡，可用李伯曼反應(yīng)，參考實(shí)驗(yàn)二“注三”項(xiàng)下。

注二：回收石油醚的方法見(jiàn)實(shí)驗(yàn)一“注四”項(xiàng)下。

注三：所得薯蕷皂苷元（粗品）用石油醚抽洗后，即可測(cè)定熔點(diǎn)，若熔點(diǎn)不合格時(shí)，才進(jìn)行重結(jié)晶。

薯蕷皂苷元的鑒定：

1．熔點(diǎn)測(cè)定：204～209℃

2．薄層層析鑒定：

應(yīng)只呈現(xiàn)一個(gè)與標(biāo)準(zhǔn)Rf值一致的色斑。

樣品：白色結(jié)晶的無(wú)水醇液

標(biāo)準(zhǔn)品：薯蕷皂苷元無(wú)水醇液

1）吸附劑：AI2O3軟板（中性100～200目，活性Ⅲ級(jí)）

展開(kāi)劑：苯一甲醇（9：1）

2）吸附劑：硅膠H-CMC硬板

展開(kāi)劑：石油醚-乙酸乙酯（7：3）

顯色劑：10%磷鉬酸乙醇溶液。噴霧后加熱10～20分鐘

3）化學(xué)反應(yīng)：

①Liebermann-Burchard反應(yīng)

②CHCI3-濃H2SO4試驗(yàn)

③五氯-化銻反應(yīng)（Kahlenberg反應(yīng)）：與五氯-化銻的氯-仿溶液呈紫藍(lán)色。

4）制備衍生物：

乙酰化物的制法：取樣品100mg溶于3ml吡啶中，加入20ml醋酐，煮沸半小時(shí)至一小時(shí)后，將反應(yīng)物倒入冰水中（冬季操作使用冷水即可）。待析出白色晶體后，抽濾，析出物丙酮重結(jié)晶即得。mp196～193℃。

5）紫外吸收光譜的測(cè)定：

取樣品5mg，加入濃H2SO4 10ml，在40℃水浴上加熱1小時(shí)，放冷，測(cè)定。薯蕷皂苷元應(yīng)有以下zui大吸收峰：

λmax 271nm 415nm 514nm

10gε 3.99 4.06 3.6