我們?cè)谧鰧?shí)驗(yàn)時(shí)，常會(huì)遇到elisa試劑盒顯色淡靈敏度偏低的問(wèn)題，以下是根據(jù)不同問(wèn)題可能原因及其防止方法總結(jié)，僅供參考。
可能原因及防止方法：
1．孵育反應(yīng)時(shí)間不足
定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí)
2．洗滌時(shí)沖擊力太大，洗滌液浸泡時(shí)間太長(zhǎng)，洗滌次數(shù)增加
減少洗滌沖擊力，按說(shuō)明書要求保留洗滌時(shí)間，準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù)
3．顯色劑滴加量不足或順序顛倒，或混合后加入
滴加顯色液時(shí)，滴瓶垂直向下，持力均勻，滴速不宜過(guò)快，先加顯色劑 A，反加顯色劑B，不可將A、B液混合后加入
4．顯色劑反應(yīng)時(shí)間不足
準(zhǔn)確定時(shí)
5．蒸餾水水質(zhì)有問(wèn)題
測(cè)定蒸餾水配制試劑對(duì)酶免疫法的影響
6．試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng)，溫度太高
試劑盒置保溫箱內(nèi)運(yùn)輸，并放足夠數(shù)量的冰塊，盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間
7．試劑、樣品用前未能平衡
用前試劑、樣品置室溫平衡 30分鐘左右。
8．樣品和NaN 3 防腐，抑制了酶的反應(yīng)
樣品不能加 NaN 3 防腐
9．試劑盒超過(guò)有效期
超過(guò)效期試劑盒不要使用
10．試劑開啟時(shí)間過(guò)長(zhǎng)長(zhǎng)菌
試劑開啟后請(qǐng)盡量在短時(shí)間內(nèi)用完
11．移液器吸量不足，移液抽吸排放太快，吸頭內(nèi)壁掛液太多或內(nèi)壁不清潔
校正移液器，吸頭要配套，每次裝吸頭要吻合緊密。移液不宜過(guò)快，排放應(yīng)完全。吸頭內(nèi)壁要清潔，zui好一次性使用。
12．恒溫箱溫度不足37℃或水浴鍋水溫度不足37℃）
放入反應(yīng)板時(shí)注意培養(yǎng)箱溫度，及時(shí)調(diào)整，孵育反應(yīng)期間開啟不宜太多，影響溫度平衡